188体育平台首页液體培養基氨基酸的檢測濁度測

作者:188体育平台首页   |   时间:2020-05-01 09:47   |   浏览:173   

188体育平台首页液體培養基中產生的氨基酸的檢測微生物學測定法液體培養基中氨基酸產生菌的檢測,通常要比瓊脂平板上腳檢測花費更多的時間,付出更大的勞動。菌種的分離按前述方法從天然來源中分離。從平板上挑取單個菌落,培養于各自的瓊脂,斜面內。斜面菌種長成后,接種到通常由豐富的營養成分混合組成的液體培養基內。種子培養基用于獲得在生理上處于氨基酸產生期的菌種。通常按5g6的體積比,將種子培養物接種到發酵培·養基中。除非特殊的情況另有不同的要求,接種菌種的發酵培養·基,一般于28~3了℃培養3~5天。測定時,吸取5~10毫升桿·晶,首先讓其暴露于流動的氣流中約10分鐘,以便使游離細胞內的氨基酸釋放出來。然后,將樣品冷卻并離心,陳去細胞及其他懸浮的固形物,上清液供測定用。(1)方法I濁度測定法利用濁度法以及下面介紹的滴定法測定液體培養物時,要求樣品中不含有培養物內的菌體細胞,將樣品通過為使液體滅菌而設計的微生物過濾器,來除去細胞。例如,當測定賴氨酸等樣品時,要求將過濾好的培養液,按逐步增加的體積(o~3毫升)加到三只為一組的清潔的無菌試管中,每只試管盛有3毫升的二倍濃度的賴氨酸測定培養基。然后,用無菌蒸餾水將體積增加到6毫升。將不接入菌種的發酵培養基與含有15微克/毫升賴氨酸測定培養基相混合,組成對照樣品。其后的操作步驟也按上述同樣步驟處理。所有試管都接種入一滴賴氨酸測定用的標準菌種腸膜狀明串珠菌ATCC8042號菌株。將試管于37℃保溫16~23小時,在此期間測定菌體的生長。由菌體生長產生的細胞密度或濁度,取決于樣品中存在的賴氨酸的數量。已知樣品的濁度(光密度或OD)對賴氨酸濃度作圖,基本上得到一條直線。人們可以用它由相應的光密度讀數求出未知樣品中賴氨酸的含量。(2\方法Ⅱ滴定法滴定法測定氨基酸所作用的技術,基本上與濁度測定法所使·用的技術相類似。兩者主要的區別在于測定反應的方式不同。在濁度測定法中,根據光吸收或濁度的變化來檢測測定用菌種對氨基酸的反應,而在滴定法中,根據生理反應的變化,特別是酸的產生來進行測定。腸膜狀明串珠菌ATCC8042菌株可由葡萄糖‘產生酸,其產生速度主要取決于測定培養基中賴氨酸的濃度。